資料庫
FH-R16-大鼠心臟纖維原細胞說明書
-
本文由 上海富衡生物科技有限公司 整理匯編
2024-05-30 09:33 35閱讀次數
文檔僅可預覽首頁內容,請下載后查看全文信息!
-
立即下載
FH-R16-大鼠心臟纖維原細胞說明書
更多資料
-
FH-R16-大鼠心臟纖維原細胞說明書
- FH-R16-大鼠心臟纖維原細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-M016-小鼠心臟纖維原細胞說明書
- FH-M016-小鼠心臟纖維原細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R191-大鼠椎間盤纖維環細胞說明書
- FH-R191-大鼠椎間盤纖維環細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R107-大鼠精原干細胞說明書
- FH-R107-大鼠精原干細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R06-大鼠肺成纖維說明書
- FH-R06-大鼠肺成纖維說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-M185-小鼠椎間盤纖維環細胞說明書
- FH-M185-小鼠椎間盤纖維環細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
小鼠心臟成纖維細胞說明書
- 小鼠心臟成纖維細胞說明書1、組織來源:小鼠乳鼠2、產品規格:25cm2培養瓶3、細胞簡介:小鼠心臟成纖維細胞分離自正常大鼠心臟組織,細胞呈梭型、多邊形等不規則形狀。體外培養的小鼠心臟成纖維細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。本公司生產的小鼠心臟成纖維細胞采用酶解法制備而來,細胞總量約為1×106個/瓶,細胞純度可達85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。二、使用方法客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。1、取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置6-8小時,以穩定細胞狀態;2、待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養;3、細胞傳代(1)吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;(2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中,37℃溫浴1-2min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;(3)用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5ml,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;(4)待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。(備注:由于實驗所用試劑與操作環境的不同,以上方法供各實驗室參考。)三、注意事項1、培養基于4℃條件下可保存3-6個月;2、在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作;3、傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態;4、該細胞只可用于科研。[詳細]
-
2024-10-03 20:19
產品樣冊
-
FH-R182-大鼠背根神經節細胞說明書
- FH-R182-大鼠背根神經節細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R160-大鼠腦膜細胞說明書
- FH-R160-大鼠腦膜細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R69-大鼠軟骨細胞說明書
- FH-R69-大鼠軟骨細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R141-大鼠腮腺細胞說明書
- FH-R141-大鼠腮腺細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R130-大鼠胎膜細胞說明書
- FH-R130-大鼠胎膜細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R138-大鼠胰島β細胞說明書
- FH-R138-大鼠胰島β細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R136-大鼠胰島細胞說明書
- FH-R136-大鼠胰島細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
大鼠降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒使用說明書
- 大鼠降鈣素原(PCT)試劑盒(ELISA)使用說明書l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中大鼠降鈣素原(PCT)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠降鈣素原(PCT)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠降鈣素原(PCT)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8°C1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。4.細胞培養物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。注:標本溶血會影響Z后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。標本處理1.本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。2.實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。4.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。5.若樣本為細胞培養上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態、細胞數量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板8孔×12條8孔×6條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無備注:1.標準品濃度依次為:800、400、200、100、50、0pg/mL2.經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過Zda標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。注意事項嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。在儲存和溫育時避免強光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。不能使用過期產品。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準備試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結果計算以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍:25pg/mL800pg/mL。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于1.0pg/mL。3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4.重復性:板內變異系數小于10%,板間變異系數小于15%。說明1.由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產品可能存在一定的質量技術風險。2.Z終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關,請務必準備充足的標本備份。3.不同批次的同一產品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據試劑盒內說明書進行實驗操作,網站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到**的檢測結果。問題解答若實驗效果不好,請及時對顯色結果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯系我公司技術支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:問題可能原因解決方案標準曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器,極ng確加入試劑溫育時間不正確保證充足的溫育時間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度酶標記物或底物失效通過混合酶標記物和底物,顏色應迅速顯現來檢查沒有加入終止液按照說明書實驗操作步驟加入終止液超出讀數時間讀數在說明書推薦的讀數時間內讀數樣本值不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本,使用新鮮樣本進行實驗不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測物質在樣本中含量低使用新鮮樣本,重復實驗[詳細]
-
2018-11-16 10:01
產品樣冊
-
大鼠成纖維生長因子(FGF)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網址:http://www.westang.com大鼠成纖維生長因子(FGF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠FGF-basic單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的FGF-basic與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠FGF-basic,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,FGF-basic濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中FGF-basic濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應FGF-basic含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的FGF-basic檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠FGF-basic。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
-
2018-09-13 10:00
產品樣冊
-
大鼠ELISA試劑盒包皮成纖維的說明書
- 大鼠ELISA試劑盒細胞生長特性人包皮成纖維細胞HFF細胞貼壁生長細胞特種特性從新生兒包皮中分離建立,可用作飼養層細胞,用于支持胚胎干細胞的生長或維持胚胎干細胞的未分化狀態。培養基DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)血清10%FBS 細胞傳代方法1:2傳代;3~4天1次細胞傳代情況P18細胞凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性A51805CCR6/CD196細胞表面趨化因子受體6抗體0.1mlA51806CXCR6細胞表面趨化因子受體6抗體0.1mlA51807CCR7/CD197人包皮成纖維細胞HFF細胞細胞表面趨化因子受體7抗體0.1mlA51808CXCL10CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10抗體0.1mlA51809CXCR7/RDC1細胞表面趨化因子受體7抗體0.1mlA51810CCR8細胞表面趨化因子受體8抗體0.1mlA51811CCR9細胞表面趨化因子受體9抗體0.1mlA51812CCL28/MEC粘膜相關上皮趨化因子28抗體0.1mlA51813CCR10人包皮成纖維細胞HFF細胞細胞表面趨化因子受體10抗體0.1mlA51814CCRK細胞周期相關激酶抗體0.1mlA51815CD10/CALLA/NeprilysinCD10抗體0.1mlA51816CD105/EndoglinCD105抗體0.1mlA51817cIAP1/RNF48凋亡YZ因子1抗體0.2mlA51818CD105/EndoglinCD105抗體0.1mlA51819API2凋亡YZ因子2抗體0.2mlA51820TRAK1驅動蛋白結合蛋白1抗體0.2ml大鼠ELISA試劑盒A51821CD117/c-kit/SCFR干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原抗體0.1mlA51822phospho-c-kit(Tyr936)磷酸化原癌基因c-kit抗體0.1mlA51823Phospho-c-Kit(Tyr703)磷酸化原癌基因c-kit抗體0.1mlA51824Phospho-c-Kit(Tyr721)磷酸化原癌基因c-kit抗體0.1mlA51825Phospho-c-Kit(Ser741)磷酸化原癌基因c-kit抗體0.1mlA51826CD133antigen造血干細胞抗原CD133抗體0.1ml[詳細]
-
2018-09-19 10:00
產品樣冊
-
FH0101-人原髓細胞白血病細胞;HL-60
- FH0101-人原髓細胞白血病細胞;HL-60[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R154-大鼠表皮黑色素細胞說明書
- FH-R154-大鼠表皮黑色素細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
-
FH-R144-大鼠表皮角化細胞說明書
- FH-R144-大鼠表皮角化細胞說明書[詳細]
-
2024-05-30 09:33
應用文章
Copyright 2004-2025 yiqi.com All Rights Reserved , 未經書面授權 , 頁面內容不得以任何形式進行復制
主站蜘蛛池模板:
激情视频91_成人免费视频软件网站_亚洲欧美色中文字幕在线_变态视频在线观看_欧洲日韩在线观看_久久久精品在线_亚洲天堂男人影院_看毛片网
|
国产精成A品人V在线播放_亚洲av久久久噜噜噜噜_爆乳护士一区二区三区在线播放_国产精品1区_亚洲色图xxx_国产精品夜间视频香蕉_精选的2019中文字幕视频_69免费在线视频
|
欧美日产国产成人免费图片_日日拍夜夜嗷嗷叫国产_日韩—二三区免费观看av_最好看免费观看高清视频大全国语_91精品国产综合久久久久久蜜臀_久久免费看少妇高潮A片麻豆_国产人妻久久精品二区三区特黄_久久精品一本久久99精品
|
艳妇荡乳豪妇荡乳av精东_噜噜吧噜噜色_亚洲国产第一区_七级黄色片_久久国语精品_99er在线观看_爱爱视频一区_青青草自拍
|
123区在线_bb日韩美女预防毛片视频_程视频精品视频一区二区三区欧_欧美一区日本一区韩国一区_久久久er热这里只有精品2_欧美精品一区二区免费_久久精品亚洲精品艾草网_男人的天堂官网
|
麻豆911传媒_视色视频_91成品人网页进入入口_国产精品亚洲一区二区三区天天看_无码人妻aⅴ一区二区三区鲁大师_男人放进女人阳道动态图_久久久网站_99热99热99
|
日本精品在线免费观看_久久综合射_久久久橹橹橹久久久久高清_青青操五月天_多人伦精品一区二区三区视频_久久精品中文无码资源站_99久久这里有精品_秋霞理论福利院
|
四虎影院观看_日本久久高清视频_曰韩黄色片_欧美性受xxxx黑人x丫x性爽_伊人久久天堂_特级黄色毛片_国产丰满大波大屁股熟女_性受xxxx黑人xyx蜜桃
|
二区三区在线_国产好吊视频在线观看_91丨九色丨黑人外教_欧美黄色网络_久久性网站_精品国产京东免费人成网站_美脚丝袜一区二区三区在线观看_91麻豆国产福利在线观看宅福利
|
国产高清在线视频观看_欧美肉大捧一进一出免费视频_台湾91视频_亚洲国产精品无码久久久不卡_成人激情视频在线观看_国产成人免费视频网站高清观看视频_国内黄色大片_九九视频免费在线
|
粉嫩蜜臀av国产精品网站_一级级黄_日韩高清中文字幕一区二区_黄色影院免费看_农村熟女大胆露脸自拍_中文字幕亚洲二区_一本岛视频在线观看_亚洲欧美日韩不卡
|
激情在线视频网站_日韩午夜在线观看_97精品伊人久久久大香线蕉_久久夜色精品亚洲噜噜国产mv_蜜桃嫩草_日本黄色天堂_国产69精品久久久久9999APGF_成人黄色视频免费观看
|
日韩精品成人网_在线欧美成人_色欲av久久无码影院色戒_亚洲国产日韩av_日本二三本的区别免费_欧美一级黄_女主播扒开屁股给粉丝看尿口_www.成人亚洲
|
青热久思思_成人AV导航_mmm·www看片免费观看_麻豆文化传媒www网站入口_国产乱码一区二区三区免费_国产成人啪精品午夜在线观看_日本黄色片视频_国产乱一区二区
|
精品国产一区a_欧美日韩二_国产亚洲一卡2卡3卡4卡老狼_亚洲福利在线看_精品欧美一区二区三区久久久_日比视频在线观看_在线超碰免费_麻花传媒沈芯语老师家访
|
亚洲亚洲精品三区日韩精品在线视频_6699久久久久久久77777'7_免费在线观看视频完整_精品av中文字幕在线毛片_aⅴ免费在线观看_深夜免费观看视频_日韩一区二区观看_日韩国产成人无码AV毛片蜜柚
|
亚洲精品久久久久www_以色列最猛性xxxxx视频_国产一区欧美二区_自拍偷拍视频亚洲_日本日本熟妇中文在线视频_五月丁香好婷婷开心网_欧美激情视频一区二区三区免费_好男人在线视频
|
夜鲁夜鲁很鲁在线视频视频_深夜福利免费看_天天骑天天干_亚洲精品无码一区二区四区_天天爽夜夜爽成人爽_欧美视频色_996热re视频精品视频这里_天天摸夜夜添夜夜无码
|
插我一区二区在线观看_日韩综合av_狠狠狼鲁亚洲综合网_台湾无码一区二区_亚洲精品无码日韩国产不卡AV_在线观看欧美一区_久久人人av_一级片在线免费观看视频
|
操操操爱爱爱_久色88_国产99视频精品免费观看6_av中文字幕二区_国产尤物av尤物在线观看_特级太黄A片免费播放一_精品护士一区二区三区_久久爱99
|
人人爽人人澡人人人妻_亚洲夜色av_日韩最新免费无码视频_久久精品日韩按摩中文字幕_亚洲午夜福利717_国产成人亚洲日韩欧美久久久_15GAY男同志同性1069_www.色网
|
五月天久久777_大帝av在线一区二区三区_99c视频色欲在线_中文字幕午夜精品一区二区三区_成人在线免费看_免费看黄色大全_亚洲午夜高清国产拍_天天狠天天情天天躁
|
国产精品爱久久久久久久小说_黄色一级大片在线观看_久久精品99久久_91在线视频免费观看_www.51色.com_涩爱av色老久久精品偷偷鲁_成人二区_一本之道伊人
|
免费在线日本_毛片TV网站无套内射TV网站_不卡一本_国产日韩免费观看_久久久噜噜噜_久久久久久国产精品亚洲78_A一级片中文字幕_日韩中文字幕一区二区三区
|
国产午夜亚洲精品_毛片久久久久_七级毛片_91在线麻豆_japanese佳佳丝袜足调教_精品一区二区三区av_男人的天堂久久久_欧美40老熟妇色xxxxx
|
国内揄拍国内精品对白_中午字幕无线码一区2020_4虎av_人妻聚色窝窝人体WWW一区_夜色亚洲_免费在线激情视频_91国色_98色花堂论坛最新地址
|
国内精品影视无广告_激情国产一区二区_日韩一区二区免费在线观看_免费看的av网站_91久久色_国产综合不卡_www麻豆_日韩视频网站在线观看
|
av色国产色拍_亚洲欧美日本在线观看_久久黄色录像_99热这里只有精品8_天天色天天操天天_看全色黄大色黄女片_日本久久片_成人在线欧美
|
av不卡免费观看_99久久免费看精品国产一区非洲_久久精品激情_老人内射视频代码免费视频_色视频在线免费_国产成人精_亚洲久久成人_欧美一区免费在线观看
|
写真福利视频_香蕉尹人综合在线观看_欧美中文字幕第一页_亚洲国产精品无码一线岛国_一本到无码av专区无码不卡_国产精品一区二区在线观看99_欧美激情A片久久久久久_青青操在线播放
|
国产乱一乱二乱三_免费黄色在线_国产高清一_香蕉国产9_国产精品午睡沙发系列_国产精品午夜无码A体验区_欧美人与动牲交ZOZO_国产精品久久久久久久久大全
|
久久久免费看视频_99爱国产_午夜免费_brazzershd欧美情趣丝袜_日本一级黄色大片_成人性生交大片免费看中国A片_久久婷婷国产综合精品_精品国产一区二区三区av性色
|
欧美一级特黄aaaa_亚洲综合麻豆_人妻日本无中文字幕无码_久久久久毛片_www.伊人久久_老司机精品影院_成全动漫在线观看免费观看_日本亚洲网站
337P大尺度啪啪人体_国产一二三视频_在线亚洲网站_91av一二三区_小鸟酱福利视频_999观看免费高清www_婷婷日日_国产91精品欧美
|
久久丫精品国产免费_黑人狂躁日本妞一区二区三区_男人午夜网站_成人高清在线视频_精品一区在线免费观看_8mav精品成人_夜精品无码A片一区二区蜜桃_aⅴ色国产欧美
|
极品束缚调教一区二区网站_久久三级精品_日韩免费卡一卡二新区_中文不卡视频_亚洲日产色情偷拍_忍着娇喘人妻被中出中文字幕_国产日韩三区_天天在线干
|
在线播放中文_亚洲欧美日韩中文高清WWW777_日日干夜夜撸_亚a∨国av综av涩涩涩_国产片在线观看免费观看_久久亚洲热线2020精品_久久久91精品国产一区二区三区_无码国产精品人妻一区二区
|
国内自拍五区_被黑人的巨茎日出白浆_中文字幕第一区二区_国产亚洲美女精品久久久_亚洲porn_国产伦一区二区三区色一情_人人草人人人_久久无码字幕中文久久无码
|
国产专区亚洲精品无码_国产一级录像_18禁无遮挡无码啪啪网站_欧美人成片免费看视频_色哟哟亚洲精品一区二区_日本极品少妇videossexhd_亚洲精品在线免费看_在线观看一区
|
超碰二区_精品剧情V国产在线观看_色屁屁WWW免费看欧美激情_国产美女裸体丝袜喷水视频_免费又黄又爽又猛大片午夜_在线黄色av网站_国产91白丝在线播放_高潮喷水的网站
|
人妻少妇精品无码专区二区_优酷在线观看_午夜影剧_国产无遮挡18禁无码网站免费_av黄色小说_日本免费不卡一区二区_日韩中字在线观看_国产精品外围在线观看
69ww免费视频播放_午夜影院伦理片_久久无码人妻一区二区三区_国产成人亚洲精品无码Av大片_国产在线欧美_重生男人_精品福利一区二区三区_www.久草
|
欧美日韩国产一中文字不卡_亚洲九九视频_成人AV综合在线网站_亚洲人成人伊人成综合网无码_波多中文字幕_日韩亚洲av综合_青草国产精品久久久久久久久_一区二区三区四区不卡在线
|
參與評論
登錄后參與評論