實驗室日常的一天

從離心開始

……

使用臺式離心機提取基因組 DNA

美妙的電機馬達聲響起

那是獨屬于你的交響樂演奏

按照常規的提取 protocol

整個實驗過程需要

至少使用離心機 3 次以上……

這些東西重復了許多遍

也許你早已刻入骨 髓

但你真的理解

不同離心機之間的區別嗎

…… 

小 E 最全離心機科普來了！

這些常伴你左右的“分離管家”

你真的了解它嗎？

快隨小 E 一起來看看吧！

*文末有福利，千萬不要錯過哦

離心機基本原理

離心機是一種高速旋轉的儀器，在驅動電機的帶動下，載有樣品的轉子圍繞離心軸進行快速旋轉，過程中產生的離心力模擬地球重力場的作用，使樣品做沉降運動，從而對不同密度或不同顆粒大小的樣品進行快速沉淀分離。

作為生物實驗室的“分離管家”，離心機除了能夠提取 DNA、RNA、質粒、感受態細胞外，各種生物大分子和納米材料的獲取和制備也離不開它，離心機儼然已經穩坐科研和生產實驗室儀器 C 位。

雖然對于離心機大家都不陌生，但是，型號如此眾多的離心機，它們究竟是如何劃分的呢？

離心機分類標準

離心機按照用途可分為：

▲ 分析型離心機

▲ 制備型離心機

制備型離心機一般用來分離各種生物材料，分離的樣品量比較大，也是大多數科研實驗室配備的離心機種類。

制備型離心機按轉速又可以分為以下三類：

  ▲ 低速離心機

  ▲ 高速離心機

  ▲ 超速離心機

低速離心機的轉速一般低于 15,000 xg，往往是體型緊湊的臺式離心機。

按功能劃分，又可分為微型臺式離心機和多功能臺式離心機。

部分臺式離心機具有冷凍離心的功能。

多用于小規模樣品中可沉淀顆粒的分離例如從培養基中分離細胞，或者制備常規的組織勻漿；

高速離心機一般指的是轉速介于 15,000 xg～110,000 xg 的離心機，根據離心體積可以分為臺式高速離心機和落地高速離心機。且很多高速離心機具有冷凍功能，往往又被稱為高速冷凍離心機。

大容量離心機，大多為落地款。

且很多高速離心機具有冷凍功能，往往又被稱為高速冷凍離心機。

主要用于菌體、細胞器的分離和生物大分子的制備。

超速離心機顧名思義，轉速往往高于 110,000 xg，甚至高達 1050,000 xg，能滿足低溫離心的需求。

多用于亞細胞結構的分離和生物大分子如核酸、蛋白、病毒顆粒、納米粒子等的大規模制備。

雖然這三種類型的離心機功能不盡相同，但往往需要搭配使用，有時甚至缺一不可。

應用流程中的離心機使用

以大規模制備腺相關病毒（Adeno-Associated Virus，AAV）載體為例，由于 AAV 安全性好、宿主細胞范圍廣以及不整合到宿主細胞基因組等諸多特點，使得離心機成為基因治 療中的得力工具。

可以說，從上游分子克隆階段中重組載體的構建，到下游產物表達中病毒顆粒的回收，離心機的身影無處不在。

重組載體的構建和細胞培養

將外源基因構建到 AAV 載體的過程中，重組質粒載體的制備純化離不開臺式/高速離心機，而細胞轉染前的復蘇階段，多功能臺式離心機的水平轉子則可以幫助復蘇的細胞進行溫和沉降，為后續細胞轉染/AAV 包裝做準備。

Eppendorf 5910Ri 離心機搭載氣密性 Quicklock? 轉子蓋，能夠時刻保證離心病毒顆粒等危險樣品的安全性。且獨特的通用水平轉子 S-4xUniversal 可滿足多種耗材的無縫離心切換，一臺搞定多種離心操作。

rAAV顆粒的收集和純化

從產生重組病毒顆粒(rAAV)的細胞中分離 rAAV 的過程中，由于 AAV 病毒顆粒（直徑介于20nm-26nm）的沉降系數較小、低轉速，低離心力無法使病毒沉降，通常需要 60,000 ×g 以上的離心力來進行有效分離。

因此，破碎細胞后，需要利用高速離心機對溶液中的 rAAV 進行初步富集。在這一步驟中，提取出的 rAAV 顆粒溶液中仍舊包含部分宿主蛋白和核酸，因而需要更近一步的純化或細胞轉染驗證。

Eppendorf 高速落地離心機系列，可提供獨特的 1.5L 大容量三角瓶，最 高可滿足 6L 的離心容量，加快樣品的收集流程，讓您快速離心，省事放心！

高純度 rAAV 顆粒的制備

對于轉入動物體內乃至需要應用于臨床的 rAAV，下游的精細純化步驟至關重要。我們的最 終目的是需要保證 rAAV 的高純度，不能含有任何殘留的細胞或培養基雜質。而病毒顆粒的大規模純化，目前最主流的方法之一是基于超速離心機的氯化銫或碘克沙醇法的密度梯度離心。這個方法可以有效地清除空白病毒粒子，并填補其他純化方法的短板。

Eppendorf CP-NX 系列超速離心機可搭載多種特定離心轉子，滿足大量病毒樣品高純度的分離純化需求。

此外，CP-NX 系列超速離心機還可提供生物安全選項（可在工廠或現場完成微濾器改造），保證病毒樣品分離純化過程的生物安全性，保障實驗人員及環境安全。

專業、安全、高效、便捷一直都是我們的一貫宗旨，無論您是初出茅廬的實驗室的小白，還是深諳樣品制備的宗師級人物， Eppendorf 離心機全線產品均可滿足您在研發、生產環節中對于離心機的需求，并為您提供及時的技術支持與保障。

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秀出你的實驗室豪華搭檔

活動一：秀出搭檔

秀出你的 Eppendorf 臺式離心機和超速離心機/高速落地離心機的 CP 組合，有機會獲得多款精美獎品。

https://www.wjx.cn/vj/hJp9FnX.aspx?udsid=413639

活動二：發文有獎

如果您已經在 Eppendorf 品牌的高速落地/超速離心機的協助下發表文章，參與活動即可獲得價值 500 元的科學有“離”獎！

https://www.wjx.cn/vj/Q8opp8F.aspx?udsid=917342

*活動須知：臺式離心機僅限 Eppendorf 品牌，高速落地/超速離心機僅限Himac（Hitachi / 日立）品牌

如何查閱活動結果？

在公眾號對話框中輸入“活動結果”就會顯示近期活動結果,還未顯示的活動請不要著急哦，小 E 會在活動結束后的 10 個工作日內公布。