前言

苯并芘又稱苯并[α]芘，英文縮寫B(tài)aP，是一種常見的高活性間接致癌物和突變?cè)１讲α]芘釋放到大氣中以后，總是和大氣中各種類型微粒所形成的氣溶膠結(jié)合在一起，在8微米以下的可吸入塵粒中，吸入肺部的比率較高，經(jīng)呼吸道吸入肺部，進(jìn)入肺泡甚至血液，導(dǎo)致肺癌和心血管疾病。

加壓流體萃取技術(shù)是近年來發(fā)展起來的一種在高溫、高壓條件下快速處理固體或半固體樣品的方法，與常用的索氏提取、超聲提取、微波萃取技術(shù)等方法相比，具有節(jié)省溶劑、快速、回收率高、健康環(huán)保、自動(dòng)化程度高等明顯優(yōu)勢(shì)。

本實(shí)驗(yàn)參考方法HJ 956-2018，使用萊伯泰科全自動(dòng)GX快速溶劑萃取系統(tǒng)（Flex-HPSE）提取吸附膜中的苯并[α]芘，SPE1000全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)凈化，M64高通量平行濃縮系統(tǒng)濃縮后用GX液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)的一整套方法。實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)便、回收率較高且平行性良好，適用于環(huán)境空氣中苯并[α]芘的檢測(cè)。

1、儀器與試劑

1.1 Flex-HPSE全自動(dòng)GX快速溶劑萃取系統(tǒng)（萊伯泰科公司）；

1.2 SPE1000全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)（萊伯泰科公司）；

1.3 M64高通量平行濃縮系統(tǒng)（萊伯泰科公司）；

1.4 LC600GX液相色譜儀，配有熒光檢測(cè)器（萊伯泰科公司）；

1.5 苯并[α]芘標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1000μg / mL，溶劑為乙腈）；

1.6 苯并[α]芘標(biāo)準(zhǔn)中間液 （30μg / mL，溶劑為乙腈）；

1.7 苯并[α]芘標(biāo)準(zhǔn)使用液（3μg / mL，溶劑為乙腈）；

1.8 二氯甲烷（色譜純）；

1.9 正己烷（色譜純）；

1.10 乙腈（色譜純）；

1.11 二氯己烷-正己烷混合溶液：3+7；

1.12 硅膠固相萃取柱（1g/6mL，LabTech）；

1.13 超細(xì)石英纖維濾膜

2、環(huán)境空氣樣品處理

2.1 提取

將采樣后的濾膜放入快速溶劑萃取罐中，設(shè)定萃取溫度100℃，壓力1500psi（10.34Mpa），靜態(tài)萃取5min，萃取溶劑為二氯甲烷（1.8），淋洗體積為60%池體積，氮?dú)獯祾?0s，循環(huán)次數(shù)2次，萃取液收集在60mL收集瓶?jī)?nèi)，具體方法如圖1所示。

圖1 加速溶劑萃取方法

2.2 濃縮

將收集管直接置于M64中，濃縮溫度40℃，開啟氮吹針定時(shí)跟隨功能。濃縮過程中使用正己烷淋洗收集管，Z后置換溶劑為正己烷，樣品體積在1mL左右。

2.3 凈化

凈化過程采用硅膠固相萃取柱凈化，具體方法如下：

按照?qǐng)D2方法進(jìn)行凈化實(shí)驗(yàn)，其中洗脫溶劑為二氯己烷-正己烷混合溶液（1.11），收集液用M64濃縮至近干，用乙腈定容至1mL，待測(cè)。

圖2 硅膠固相萃取柱凈化方法

2.4 空白加標(biāo)處理

按2.1方法裝填空白濾膜過程中，加0.1mL標(biāo)準(zhǔn)使用液（1.7）至萃取罐中，然后按照2.1~2.3方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，Z后用乙腈定容至1mL，以此來測(cè)定空白加標(biāo)回收率。

2.5 儀器參考條件

色譜柱：C18 4.6mm*250mm；柱箱溫度：30℃；柱流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量：20μL；熒光檢測(cè)器的激發(fā)波長(zhǎng)/發(fā)射波長(zhǎng)：305nm/430nm；流動(dòng)相：乙腈水（8+2）。

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1苯并[α]芘標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

圖3 500ng/mL苯并[α]芘標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

3.2 空白加標(biāo)色譜圖

圖4 300ng/mL空白加標(biāo)色譜圖

3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

分別移取適量苯并[α]芘標(biāo)準(zhǔn)使用液（1.7），用乙腈（1.10）稀釋，制備標(biāo)準(zhǔn)系列，質(zhì)量濃度分別為0.025μg / mL、0.050μg / mL、0.100μg / mL、0.500μg / mL、1.00μg / mL、2.00μg / mL。

將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液依次注入GX液相色譜儀，按照儀器參考條件（2.5）檢測(cè)，得到不同濃度的苯并[α]芘的色譜圖。以濃度為橫坐標(biāo)，以其對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如下圖5所示。

圖5 苯并[α]芘標(biāo)準(zhǔn)曲線

3.4 空白加標(biāo)回收率

表1空白加標(biāo)回收率

4、結(jié)論

由表1可知，GX溶劑萃取-固相萃取-GX液相色譜法測(cè)定環(huán)境空氣中的苯并[α]芘，加標(biāo)回收率為93.0%~116.6%，RSD為9.6%。本方法測(cè)定的加標(biāo)量為0.3μg，樣品無檢出。

60mL收集管同時(shí)適用于這三種儀器，實(shí)驗(yàn)過程中不需要進(jìn)行液體的轉(zhuǎn)移，能夠有效的減少轉(zhuǎn)移過程中造成的損失。

綜上所述，GX溶劑萃取-固相萃取-GX液相色譜法測(cè)定環(huán)境空氣中的苯并[α]芘這一實(shí)驗(yàn)中，萊伯泰科Flex-HPSE全自動(dòng)GX快速溶劑萃取系統(tǒng)、SPE1000全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)和M64高通量平行濃縮系統(tǒng)能夠GX、穩(wěn)定地達(dá)到實(shí)驗(yàn)的要求，可以提供領(lǐng)域范圍內(nèi)的良好應(yīng)用。