前言

       2016年5月31日，《土壤污染FZ行動計劃》(簡稱“土十條”)正式由國務院印發實施。此次詳查對檢測項目、分析方法和參考標準做了明確的規定，其中關于土壤中硝基苯類化合物的測定，采用《土壤和沉積物 硝基苯類化合物的測定 氣相色譜-質譜法》報批稿測試方法。

       加壓流體萃取技術是近年來發展起來的一種在高溫、高壓條件下快速處理固體或半固體樣品的方法，與常用的索氏提取、超聲提取、微波萃取技術等方法相比，具有節省溶劑、快速、回收率高、健康環保、自動化程度高等明顯優勢。

       本實驗介紹了使用萊伯泰科全自動GX快速溶劑萃取儀Flex HPSE提取土壤中的15種硝基苯類化合物，SPE1000全自動固相萃取系統凈化，MultiVap-10定量平行濃縮儀濃縮后用氣質聯用儀進行檢測的一整套方法。

1、實驗部分

1.1儀器和設備

Flex HPSE全自動GX快速溶劑萃取儀（萊伯泰科公司）

SPE1000全自動固相萃取系統（萊伯泰科公司）

MultiVap-10定量平行濃縮儀（萊伯泰科公司）

       7890B氣相色譜-5977B質譜聯用儀（安捷倫公司）。

1.2 試劑和樣品

       正己烷（色譜純）；丙酮（色譜純）；二氯甲烷（色譜純）；

       快速溶劑萃取溶劑：正己烷-丙酮混合溶劑， 1+1 （V/V）；

       固相萃取洗脫溶劑：正己烷-二氯甲烷混合溶劑，1+9 （V/V）； 

       硝基苯類化合物標準使用液（200μg / mL，溶劑為正己烷）；

       內標使用液（10 mg/L，溶劑為正己烷）；

       替代物使用液（10 mg/L，溶劑為正己烷）；

       弗羅里硅土固相萃取柱（1g/6mL，LabTech）；

       硅藻土（置于馬弗爐中450℃烘4h，冷卻后貯于玻璃瓶中于干燥器內保存）。

1.3土壤樣品處理

1.3.1 提取

       取研細過篩后的環境土樣5g，與3g硅藻土混合均勻，裝填至11mL的萃取罐中。同樣方法裝填好兩個萃取罐后，置于Flex HPSE中（雙通道運行，Z多可連續萃取30個樣品），萃取溶劑為丙酮－正己烷  (1：1，體積比) 混合溶液，系統壓力10.34Mpa，萃取溫度100℃，加熱平衡時間2min，靜態萃取時間6min，沖洗體積60%，N2吹掃60s。循環運行兩次。萃取液收集到50mL濃縮杯中。

1.3.2 濃縮

       將濃縮杯置于MultiVap-10中，室溫下，使用定容模式。濃縮過程中使用正己烷淋洗杯壁，Z后置換溶劑為正己烷，樣品體積在1mL左右。

1.3.3 凈化

       凈化過程采用弗羅里硅土柱凈化方式。具體方法如下：

       按照圖1方法進行凈化實驗，其中正己烷二氯甲烷溶液配比為1：9，體積比。收集液用MultiVap-10濃縮，中間使用正己烷溶劑置換，Z后用正己烷定容至1mL，待測。

圖1 弗羅里硅土柱凈化方法

1.4樣品加標回收率實驗

       按1.3.1方法裝填樣品，進行加標實驗，加標濃度20μg/kg，然后按照1.3.1~1.3.3方法進行實驗，共進行三組6個平行樣品，Z后用正己烷定容至1mL，用來測定加標回收率。

1.5 GC/MS檢測條件

       色譜柱：DB-5MS UI 毛細管柱30m*0.25mm*0.25μm；進樣口溫度：MMI進樣口，采用程序升溫進樣模式，60℃保持0.05min，以750℃/min升至280℃，保持0min；不分流進樣；載氣流速：1.0mL/min；恒流模式；進樣量：1.0μL；柱溫：40℃保持4min，以10℃/min升至300℃，保持2min。

       離子源：電子轟擊源，70eV；四極桿溫度：180℃；離子源溫度：280℃；輔助加熱溫度：280℃；溶劑延遲時間：6.0min；掃描模式：SIM+Scan（化合物保留時間，定量和定性離子見下表）

表1硝基苯類化合物定量和定性選擇離子

2、實驗結果

2.1  17種硝基苯類化合物色譜圖分離情況（含內標和替代）

圖2 硝基苯類化合物標準液總離子流譜圖

2.2 加標樣品的回收率

表2弗羅里硅土柱凈化加標樣品回收率

3、實驗結論

       由表2可知，加壓流體萃取-固相萃取-氣質法測定土壤中的15種硝基苯類化合物，加標回收率在50.7%-105.3%之間，替代物標準品硝基苯-D5加標回收率平均值為50.7 %，2-氟聯苯加標回收率平均值為67.1 %，完全符合標準中要求的加標樣品回收率控制范圍：40 % ~ 150 % 的質控要求。同時將六次分析的結果計算其RSD %，所有化合物的相對標準偏差均小于7.7 %，本方法測定的樣品加標濃度為20μg/kg。

50mL濃縮杯同時適用于Flex HPSE和MultiVap-10兩種儀器，實驗過程中盡可能減少液體的轉移，能夠有效的減少轉移過程中造成的損失。

       綜上所述，加壓流體萃取-固相萃取-氣質法測定土壤中的硝基苯類化合物這一實驗中，萊伯泰科Flex HPSE全自動GX快速溶劑萃取儀、SPE1000全自動固相萃取系統和MultiVap-10定量平行濃縮儀能夠GX、穩定地達到實驗的要求，可以提供領域范圍內的良好應用。

4、參考標準

1、《土壤和沉積物 硝基苯類化合物的測定 氣相色譜-質譜法》報批稿

2、HJ 783-2016 土壤和沉積物 有機物的提取 加壓流體萃取法